临床执业医师考试医学免疫学知识点免疫细胞的特异性、数量和功能的检测及相关习题：

　　1.酶免疫斑点试验（ELISPOT）该方法可在单细胞水平检测淋巴细胞对特异性抗原的反应能力及计数特异性抗原刺激下分泌淋巴细胞产生的情况。

　　2.抗原肽-MHC分子四聚体技术MHCⅠ类和Ⅱ类分子与抗原肽形成的四聚体复合物可分别鉴定表达特异性TCR的CD8+和CD4+T细胞。

　　3.T细胞功能测定技术

　　（1）T细胞增殖试验：原理是T细胞能接受PHA、ConA等有丝分裂原的刺激而转化为原淋巴细胞。在增殖过程中细胞DNA、RNA、蛋白质合成增加，细胞形态改变，最终细胞分裂。常用方法有3H-TdR掺入法、MTT法。

　　（2）细胞毒试验：CTL、NK细胞等效应细胞，对靶细胞有直接杀伤作用。选用相应的靶细胞共同培养，根据靶细胞的破坏情况，检测CTL、NK细胞等效应细胞的杀伤活性，常用方法有51Cr释放法、凋亡细胞检查法等。

　　4.B细胞功能测定技术

　　（1）B细胞增殖试验：原理见T细胞增殖试验。

　　（2）抗体形成细胞的测定：常用的是溶血空斑试验。基本原理是抗体形成细胞分泌的Ig与SRBC上的抗原结合，在补体参与下出现溶血反应。

　　5.细胞因子的检测技术检测细胞因子的方法主要有生物学检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法。

　　（1）生物活性检测：多种细胞因子（IL-2、IL-6）可刺激其靶细胞的增生。某些靶细胞严格依赖相应的细胞因子而增生，利用这些细胞因子-依赖性细胞的3H胸腺嘧啶核苷掺入量的多少就可以判定细胞因子的生物学活性。

　　（2）ELISA：常用双抗体夹心法检测IL-2、IL-5、IL-6等细胞因子。

　　（3）PCR：根据细胞因子的核苷酸序列，设计特定细胞因子引物，利用反转录PCR测定待检细胞中特定的mRNA.

　　6.芯片技术芯片技术广泛用于大规模、高通量检测病原体感染后或特异性抗原刺激后细胞内上调表达的抗原谱。

　　相关习题：

　　A. 51Cr 释放法

　　B. 溶血空斑试验

　　C. PCR 测定

　　D. MTT 法

　　E. 结核菌素试验

　　 抗体形成细胞测定

　　答案：B

　　检查CTL 细胞的杀伤作用

　　答案：A