蛋白质的等电点、沉淀和变性

时间：2020-06-24 11:04:15

一、蛋白质的等电点

在酸性溶液中，蛋白质解离成阳离子；在碱性溶液中，蛋白质解离成阴离子｡当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。

二、蛋白质的沉淀

1. 定义：蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为沉淀。

2. 主要方法：盐析、重金属离子沉淀、生物碱试剂沉淀、有机溶剂沉淀等。

3. 常用中性盐：硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等。

4. 应用：盐析沉淀的蛋白质通常不发生变性，故此法常用于天然蛋白质的分离。

三、蛋白质的变性

1. 定义：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致理化性质的改变和生物学活性的丧失，这一现象称为蛋白质变性。

2. 破坏的化学键：非共价键和二硫键（肽键和共价键不被破坏）。

3. 变性的因素：高温、高压、紫外线、X射线照射、超声波、剧烈震荡及搅拌等物理因素；强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂、高浓度尿素和十二烷基硫酸钠等化学因素。

4. 不可逆变性：蛋白质剧烈变性时其空间结构破坏严重，不能恢复。可逆变性，某些温和蛋白质变性，如持续时间较短，除去变性因素仍可恢复其活性。5. 蛋白质变性理论的临床应用：消毒灭菌、低温保存生物活性蛋白质等。

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